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Galectin―3、CK19、TPO表达在甲状腺乳头状癌诊断中2019-07-07


  [摘要] 目的 探讨Galectin-3、CK19、TPO在甲状腺乳头状癌中的表达及临床诊断意义。 方法 回顾性分析我科2010年1月~2014年12月间286例甲状腺乳头状癌和80例甲状腺滤泡性病变伴乳头状增生病例(40例滤泡性腺瘤和40例结节性甲状腺肿),应用免疫组化方法检测Galectin-3、CK19、TPO蛋白表达。 结果 Galectin-3、CK19的阳性表达率分别为98.3%和98.6%,显著高于B组的15.0%和10.0%,差异有统计学意义(P[中图分类号] R736.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2016)07-0100-03[Abstract] Objective To investigate the expression of Galectin-3, CK19 and TPO in papillary thyroid carcinoma and its clinical significance. Methods A retrospective analysis came from our department from January 2010 to December 2014, 286 cases of thyroid papillary carcinoma and 80 cases of thyroid follicular lesions with papillary hyperplasia cases (40 cases of follicular adenoma and 40 cases of nodular goiter), the expression of Galectin-3, CK19 and TPO protein was detected by immunohistochemistry. Results The positive expression of Galectin-3(98.3%) and CK19(98.6%) were respectively significantly higher than the group B (15.0% and 10.0%), the difference was statistically significant(P[Key words] Galectin-3; CK19; TPO; Papillary thyroid carcinoma近年来全球范围甲状腺恶性肿瘤呈快速增长趋势,在我国甲状腺癌也在快速增长。在发达国家,甲状腺癌占所有癌的21%,而甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carinoma,PTC)又占甲状腺恶性肿瘤的85%~90%以上[1-4]。PTC由于其肿瘤多为单发,原发病灶可能很小,需经仔细观察方能发现[5-7],且其形态学特征主要表现在细胞核上,经典的PTC具有明显毛玻璃样核、核仁、核沟、核内包含体和砂粒体,然而在实际临床诊断工作中有一些乳头状癌仅凭细胞核形态很难与一些甲状腺良性病变伴乳头状增生相鉴别。我们通过免疫组织化学方法联合检测Galectin-3、CK19、TPO,希望能找到PTC的有效标志物,帮助诊断和鉴别诊断。现报道如下。收集本院2010年1月~2014年12月间送我科病检的甲状腺乳头状病变366例,其中甲状腺乳头状癌286例(A组),甲状腺滤泡性病变伴乳头状增生病例80例(B组),年龄13~78岁,中位年龄49岁,男84例,女282例,男女比例1∶3.36,其中286例甲状腺乳头状癌(包括86例甲状腺乳头状微小癌,29例甲状腺滤泡亚型乳头状癌)。所有患者术前均进行详细问诊,行颈部超声、甲状腺功能测定等必要术前检查,部分患者行甲状腺细针穿刺细胞学检查。所有甲状腺未固定的送检标本均以0.2 cm间隔书页状平行切开,仔细观察切面,必要时结合指腹触诊,发现可疑病灶时尽量以最大面充分取材(对钙化区域行脱钙后常规石蜡切片),术中冰冻切片后标本均经10%的福尔马林固定、脱水、石蜡包埋,切片厚3~5 μm,脱蜡至水后对两组病变样本行免疫组织化学染色检查,试剂盒Galectin-3、CK19、TPO均购自于福州迈新生物科技有限公司,为即用型抗体,采用SP法,具体操作步骤参照试剂盒说明书进行。1.3 结果判定Galectin-3染色以核浆表达为主,以细胞核或细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性标准(图1);CK19和TPO染色为膜浆表达,以细胞膜或细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性标准(图2、图3)。结果参定Beesley分析方法,按阳性细胞所占的百分数并参照着色强度确定[8-10]:阳性细胞数50%为强阳性(+++)。用已知阳性片作阳性对照,磷酸缓冲液代替一抗作阴性对照。采用SPSS16.0统计学软件分析数据,计数资料以百分率表示,采用χ2检验,PA组286例PTC患者Galectin-3抗体除5例为阴性表达外,其余281例均为阳性表达,阳性表达率98.3%;B组80例甲状腺良性滤泡性病变患者以阴性表达为主,弱阳性12例,阴性68例,阳性率仅为15.0%,差异有统计学意义(χ2=271.352,PA组286例PTC患者CK19抗体除4例为阴性表达外,其余282例均为阳性表达,阳性表达率98.6%;B组80例甲状腺良性滤泡性病变患者以阴性表达为主,阴性72例,弱阳性8例,阳性率为10.0%,差异有统计学意义(χ2=298.268,PA组286例PTC患者TPO抗体249例呈阴性表达,仅有37例呈弱至中阳性表达,阴性表达率87.1%;B组80例甲状腺良性滤泡性病变患者TPO则以阳性表达为主,有74例呈阳性率表达,6例呈阴性表达,阴性表达率为7.5%,差异有统计学意义(χ2=187.282,P本组病例我们选取286例PTC和80例甲状腺滤泡性良性病变伴乳头状增生(结节性甲状腺肿和滤泡型腺瘤伴乳头状增生病例各40例)病例作为研究对象,发现Galectin-3、CK19、TPO等抗体均可作为诊断PTC的有效标志物用于诊疗中,其单项阳性(阴性)检出率均较为理想,PTC患者Galectin-3、CK19 多以阳性表达为主,而TPO表达却是以阴性为主。CK19是一种低分子量的细胞角蛋白,分子量为40kDa,存在于各种上皮和正常上皮来源的肿瘤中,有研究表明CK19在PTC中表达较强且较特异,在滤泡性腺瘤、滤泡性癌及增生性结节中均不表达或部分病例有局部弱至中度阳性表达[11,12]。本研究A组病例除4例阴性表达外,其余282例均呈不同程度的弱至强阳性表达,阳性率98.6%与上述表述一致。Galectin-3是由β-半乳糖苷键结合蛋白(Galectin-3结构域)和一个层粘连蛋白构成的嵌合体结构,它与同型细胞间的粘附有关,是一个同型细胞粘附凝集素,它的下调表示各种肿瘤的侵袭与转移的活跃度,是PTC诊断中的一个重要依据;A组病例仅有5例呈阴性表达,9例呈弱阳性表达,41例呈中阳性表达,231例呈强阳性表达,阳性率为98.3%;而对照组仅有12例呈弱阳性表达,其余68例呈阴性表达,阳性率仅为15.0%,说明Galectin-3在PTC中的表达具有较强的敏感性和特异性。TPO主要位于甲状腺上皮细胞内质网、线粒体、高尔基体及滤泡腔刷状缘等部位,直接参与甲状腺细胞中碘的氧化、酪氨酸的碘化及碘化酪氨酸的藕联等,甲状腺激素的催化主要靠TPO完成,正常人群的TPO呈阳性表达,它的丢失仅限于甲状腺恶性肿瘤患者,其敏感性可达89.5%[13-16]。本研究结果与上述报道一致,本组研究病例中A组患者仅29例呈弱阳性表达,8例为中阳性表达,其余249例均呈阴性表达,阴性表达率87.1%,B组病例仅有6例呈阴性表达,阴性率为7.5%,特异性及敏感性均较为理想。综上所述,CK19、Galectin-3蛋白在PTC中的阳性表达明显高于甲状腺良性病变,表明CK19、Galectin-3可作为初步诊断和鉴别甲状腺病变的标记物;TPO蛋白在PTC中的阴性表达率显著高于甲状腺良性病变,与CK19、Galectin-3表达呈负相关性,进一步说明CK19、Galectin-3与TPO蛋白在不同类型甲状腺病变诊断及鉴别诊断中具有敏感性和特异性,它们联合应用可作为PTC与良性病变诊断及鉴别诊断的良好标志物,同时对甲状腺病变的预后诊断具有重要意义。[1] 高键,高明,于洋,等. 甲状腺乳头状癌滤泡亚型临床病理特征分析[J]. 中华普通外科杂志,2014,29(3):199-202.[2] 赵丽华,林竟,石柏,等. P53、Ki-67、Galectin-3、HBME-1、34βE12和CK19在甲状腺乳头状癌中的表达及临床病理意义[J]. 基础医学与临床,2012,32(10):1202-1206.[3] 朱雄增,朱晓丽. 甲状腺乳头状癌及其变异型的病理学研究进展[J]. 实用肿瘤杂志,2006,13(2):117-119.[4] Hughes DT,Haymart MR,Miller BS,et al. The most commonly oc-curring papillary thyroid cancer in the United States is now a microcar cinoma in a patient older than 45 years[J]. Thyroid,2011,21(3):231-235.[5] 陈英,许跃,薛娣,等. 甲状腺乳头状癌中CK19、CD56、和VEGF-C的表达及意义[J]. 临床与实验病理学杂志,2012,28(9):1032-1034.[6] 林茂华、毛瑛玉,李婷,等. CK19、CyclinD1、HBME-1、34βE12、TPO、Galectin-3在甲状腺乳头状癌组织中的表达及意义[J]. 实用癌症杂志,2013,28(6):617-619.[7] 刘庆锰,何平生. CK8、CK19和TPO联合检测在甲状腺乳头状癌及乳头状增生病变中的诊断应用[J]. 实用肿瘤杂志,2011,26(2):153-156.[8] 郑丽,胡向阳. Galectin-3、CK19、HBME-1表述和BRAF突变在甲状腺乳头状癌中的意义[J]. 安徽医科大学学报,2013,48(4):401-405.[9] 邓敏,叶顾萍,马建中,等. 甲状腺乳头状癌中CK19,Galectin-3、HBME-1和TPO的表述及意义[J]. 临床与实验病理学杂志,2011,27(8):843-846.[10] 汪玉,冯晓冬,张志魁,等. TPO、CKl9、Galectin-3、HBME-l及CD56在甲状腺乳头状癌诊断中的应用研究[J]. 现代诊断与治疗,2015,26(13):2980-2981.[11] 孔令非. 甲状腺滤泡性病变[J]. 诊断病理学杂志,2002,9(6):324-326.[12] Wirtschafter A,Schmidt R,Rosen D,et al. Expression of the RET/PTC fusion gene as a marker for papillary carcinoma in Hashinmoto’s thyroiditis[J]. Laryngoscope,1997, 13(4):107-109.[13] 李惠,张凌,嵇庆海,等. 桥本氏甲状腺炎合并甲状腺乳头状癌的研究进展[J]. 中华外科杂志,2011,49(11):1042-1044.[14] 王平. 腔镜甲状腺癌根治术的现状与展望[J]. 外科理论与实践,2011,16(6):522-525.[15] 孙敏国. 手术联合131I甲状腺片治疗甲状腺乳头状癌30例疗效观望[J]. 山东医药,2010,50(35):90-91.[16] 刘颖. CK19、TPO蛋白表达在甲状腺乳头状癌病理诊断中的意义[J]. 中国医药科学,2015,5(5):143-144.

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